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AMPPD發光顯色試劑盒

發布時間:2021-7-16 訪問人數: 618

AMPPD發光顯色試劑盒

簡介:

AMPPD是堿性磷酸酶的化學發光底物,在適宜的緩沖液中,隨著酶的催化水解作用,AMPPD分解成AMP-D,后者發出強度很高的光信號,其發光的速度取決于堿磷酶的濃度。當堿磷酶偶合到雜交的探針時,便可以通過此系統檢測到雜交分子的存在量。乙醇胺可使光信號輸出更理想。AMPPD為1,2-二氧環已烷衍生物,它是一種生物化學領域中最新的超靈敏的堿性磷酸酶底物,其特點:反應速度快,在很短時間內提供正確可靠的結果。在它的分子結構中有兩個重要部分,一個是聯接苯環和金剛烷的二氧四節環,它可以斷裂并發射光子;另一個是磷酸根基團,它維持著整個分子結構的穩定。在通常情況下,這種化合物很穩定。但是,結果有堿性磷酸酶存在,Dioxetane Phosphate作為酶的底物會在酶的催化一脫去磷酸根基團,形成一個不穩定的中間體。這個中間體隨即自行分解(二氧四節環斷裂),同時發射光子。 AMPPD發光顯色試劑盒適用于PVDF膜,不推薦用于硝酸纖維素膜。

編號

名稱

PW0071

25T

PW0071

50T

Storage

試劑(A):

Dioxetane Buffer

A1: Dioxetane A

50ml

100ml

-20℃

A2: Dioxetane B

50ml

100ml

-20℃

臨用時,取A1、A2混合,即為Dioxetane Buffer,不可預先配制。

試劑(B): AMPPD

2.5mg

5mg

-20℃ 避光

組成:

自備材料:

1、轉印了蛋白并已以抗體-酶復合物檢測過的PVDF膜

2、Tris鹽緩沖液(TBS)

3、透明的塑料保鮮膜

4、蒸餾水

操作步驟(僅供參考)

臨用前,取適量的A1和A2,混合后獲得Dioxetane Buffer。

AMPPD溶于Dioxetane Buffer, 配制AMPPD底物溶液即為AMPPD Dioxetane Buffer(發色發光顯跡液),用于膜的染色。

取適量Dioxetane Buffer洗膜。

對于PVDF膜進行的堿性磷酸酶反應, 膜置于新鮮配制的AMPPD Dioxetane Buffer 作用。

將膜移入適量的AMPPD Dioxetane Buffer中,浸泡(AP反應)。

取出PVDF膜,滴干水分,將膜正面朝下放在一張透明的塑料保鮮膜上,向后折疊將膜包裹起來,成為不漏水的封閉體。

在暗房中,將膜正面朝下放在感光膠片上,曝光數秒至數小時。

如需要,在室溫下以適量的TBS洗膜。

將膜放入AMPPD Dioxetane Buffer。

10、用蒸餾水洗膜,終止反應。晾干后拍照留永久的記錄。

注意事項:

PVDF膜置于膠片上后,不要改變位置。

曝光時間應根據實驗情況,自行摸索。

配制好的AMPPD Dioxetane Buffer,應避光低溫保存。

為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

有效期: 12個月有效。

相關:

編號

名稱

DH0006

蘇木素伊紅(HE)染色液

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PT0001

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PW0040

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