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異硫氰酸胍常用的方法

發布時間:2020-3-11 訪問人數: 786

異硫氰酸胍(GITC),CAS593-84-0,是一種超親性試劑,常用的蛋白質變性劑,但最常用于DNARNA的提取。

常用的方法是硫氰酸鹽-苯酚-氯仿萃取法。如果提取RNA用于Northern blotting 或提取DNA用于 Southern blot analysis,則不必嚴格使用苯酚或氯仿,因為凝膠電泳后轉移到膜上將RNA/DNA從蛋白質中分離出來。此外,由于這些方法使用探針與它們的偶聯物結合,因此,通過這一過程的肽通常不重要,除非肽是RNaseDNase,而且只有在該酶設法重新生成時才重要,如果遵循適當的協議,就不應該發生這種情況。一個可能的例外可能是在處理溫度極端微生物時,因為這些微生物的一些酶在特殊情況下可以保持穩定。

異硫氰酸胍還可用于RNADNA提取中的細胞和病毒顆粒的裂解,其功能除了裂解作用外,還可通過使RNA酶和DNase酶變性來阻止它們的活性。否則這些酶會破壞提取物。

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