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鏈霉親和素(SA)的分離純化方法

發布時間:2020-3-9 訪問人數: 856

根據文獻報道,鏈霉親和素SA的分離純化有兩種方法:

(1)經典方法包括硫酸銨沉淀、離子交換層析、結晶等流程。由于硫酸銨使培養液中的SA和內源性蛋白酶被共同濃縮、沉淀,因此蛋白酶作用加強,結果使SA分子降解,最后分離到的SA 分子量為60kD 左右,許多作為商品的核心SA就是將其進步處理后得到。

(2)親和層析法,使用2-亞氨基生物素瓊脂糖凝膠4B親和柱,其與SA的親和力隨pH的下降而減弱,在pH 10~ 11范圍內,兩者緊密結合,當pH降至4時, SA即被解離下來,由于在pH 4~ 11范圍SA活性不受影響,因此分離純化SA效果良好。使用這方法可直接從培養液中分離SA,因此省略了沉淀、濃縮等步驟,從而減弱了內源性蛋白酶的作用。

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